再论生物化学发光测量仪原理,作用和特点

生物化学发光测量仪的化学发光作为一种分析工具的吸引之处就在于检测的简单性。化学发光的实质是自身发光,这意味着化学发光的分析测试仪器只需要提供一种可以检测光信号和纪录结果的方法就可以了。自发光检测仪需要一个闭光的样品室和光检测器。简单的便是相片纸或X 光片,甚至视觉检测器都可以。

化学发光检测方法的简单性使得它的应用很简单并且完全可以自动化。但是它的灵敏度又是怎么样的呢?化学发光有如下两个内在的优势:

1.绝大多数的样品没有“背景”信号,如它们自身不发光。

2.化学发光的检测不是一个比例测试,这是与荧光和吸收或比色测试不同的。在荧光测试中,具有小的Stokes Shift的荧光基团非常难检测。荧光很难从激发波长中分辨出来。 另外一个问题是,特别在样品是浑浊的情况下有一部分杂光会进入到检测器。

在吸收光测试上,其灵敏度受到限制的根本因素是需要在两个相对较强的信号之间去区分一个较小的差别。

需要注意的是检测器对光谱的敏感性近可能接近化学发光的光谱,以得到化的灵敏度。一般在自发光仪中的光电倍增管对蓝光有的反应,对红光的末端光谱不太敏感。固态检测器对红光有较好的反应。

X 光片广泛用于记录在尼龙膜、纤维素膜或PVDF 膜上的化学发光印迹分析。但是我们需要牢记在心的是X 光片仅能够用于检测紫外到蓝光光谱范围内的光信号,虽然有一些特殊的光片对增强的绿光有敏感性。

生物化学发光测量仪液体样品的检测

有一些特定的词来描绘化学发光检测:灵敏度、线性和动态范围。每一个词的意义如下:

1.灵敏度指的是某种东西可靠检测的水平。“某种东西”是指在一个分析测试中的测试物。测试物是被标记了一种可检测的东西,如化学发光化合物或的一种酶。分析物也可以是一种通过与具有标记的亲合物有特异性结合反应而检测的物质。所谓的可靠检测指的是针对一个空白测试样品,检测器能够重复感应到水平的信号,而这种信号是由所检测物本身产生的。

2.线性描述的是信号与分析检测物浓度范围之间的关系。理想的比例因子是常数;信号点与分析检测物是一条直线关系。标准曲线可以不是直线,如s 形,仍是有用的。

3.动态范围指的是被检测物浓度与信号单一模式的变换范围。它定义的是分析的工作范围。

通过生物化学发光测量仪的化学发光得到什么水平的灵敏度呢?答案不一定会满足你的要求,“它是有条件的”。在很少情况下,检测器的灵敏度或化学发光方法会是检测的局限因素。现在的检测器可以达到很高的灵敏度。大多数情况下,而是其它的一些因素显示了分析检测的灵敏度。通常的是生物成分(抗体、酶等)的非特异性结合到反应容器和支持物的表面。例如,免疫分析,印迹实验,核酸杂交和其它的酶联结合实验都是受制于此因素。